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生化分離技術
自然科學技術  農業科學  

生化分離技術

  • 田亞平     
  • 化學工業出版社
  • 7502591702
  • 2006-09-01
  • 329
  • 簡裝本
  • 16開
  • 1家書店銷售中

  • 本書內容主要包括各種材料的預處理、沉澱技術、膜分離技術、各種層析技術(包括凝膠層析、離子交換層析、層析聚焦、親和層析、反相層析、疏水層析)、各種電泳技術、一些融合技術的簡介及本課程準備開設的綜合實驗。各種技術除介紹較為詳細的原理外,還具體闡明其主要的應用範圍,並有針對性地列舉一些具體應用實例。本書內容深入,理論與應用並重,在“實驗部分”還介紹了常見生化分離實驗的詳細步驟。適於作為研究生教材或相關科研人員的參考書。
    作為生物下游技術,生化分離在整個生物技術中的作用日益顯現,其本身也不斷發展,目前主要有兩種趨勢:一是單元技術水準的提高,二是幾種技術融合或稱為集成化技術的形成。
    書中詳細地介紹了各種生化分離技術,以及某些生物大分子和小分子物質的分離純化過程,集分離原理、應用範圍、方案設計、設備選擇、操作技巧和放大技術等於一體,原理講解透徹,操作表述清晰,應用實例豐富。
    編者基於其多年教學和科研工作經驗,從用戶角度切身體驗,無論從目的產物出發選擇和組合分離技術,還是從分離效果角度優化分離條件,都給出了很好的建議。
    本書作為江南大學的研究生規劃教材,在專門設置的“實驗部分”詳細介紹了常見生化分離實驗的操作步驟,既充分體現了教學的特點,也為專業技術人員提供了實驗範例。
    因此,如果你從事生物技術的教學研究、生化藥物或其他生化產品的研發以及生物工程下游技術設備的生產,不論是高層次研究人員,或是初入實驗室的學生,本書都是一個很好的“助手”,幫助你從容應對複雜的生化產物分離問題。



    第一章緒論
    一、生化分離技術發展的歷史和地位
    二、生化分離技術的應用範圍
    三、生化分離技術的主要種類
    四、研究對象、特點及基本原理
    五、生化分離技術的基本步驟
    六、生化分離技術方案設計與選擇
    七、生化分離技術的發展趨勢
    參考文獻
    第二章生物樣品的預處理
    第一節概述
    第二節樣品分離的預提取過程
    一、植物組織提取物的製備
    二、動物組織提取物的製備
    三、細菌中重組蛋白的提取製備
    第三節細胞的破碎與分離
    一、概述
    二、常用的幾種破碎方法
    三、細胞破碎技術研究的發展方向
    參考文獻
    第三章沉澱技術
    第一節概述
    第二節沉澱方法分類
    一、鹽析法
    二、有機溶劑沉澱法
    三、等電點沉澱法
    四、非離子多聚物沉澱法
    五、選擇性變性沉澱
    六、生成鹽類複合物的沉澱
    七、親和沉澱
    八、sIs聚合物與親和沉澱
    第三節沉澱技術應用
    一、蛋白質
    二、核酸
    三、多糖
    參考文獻
    第四章膜分離技術
    第一節概述
    一、膜分離技術發展的歷史
    二、膜分離技術在分離工程中的重要作用及
    存在的問題
    第二節分類和定義
    一、膜的定義
    二、膜的分類
    第三節技術原理
    一、壓力特徵
    二、濃差極化
    三、膜分離理論
    四、膜的截留能力
    五、膜的污染
    六、納濾膜技術
    第四節膜分離主要參數
    一、國內外主要膜和組件產品簡介
    二、膜組件的選擇
    三、膜的選擇及使用
    第五節操作技術
    一、超濾和微濾過程的預處理
    二、膜的操作
    三、污染膜的清洗和膜性能的再生
    第六節膜分離技術的應用
    一、微濾的應用
    二、超濾的應用
    三、納濾的應用
    參考文獻
    第五章凝膠過濾層析
    第一節概述
    第二節原理
    一、凝膠過濾的概念
    二、生物分子的相對分子品質、分子大小和形狀
    三、凝膠過濾的有關理論問題
    第三節凝膠過濾介質
    一、凝膠過濾介質的基本結構
    二、凝膠過濾介質的參數及性質
    三、凝膠過濾介質的主要類型
    第四節實驗方案設計
    一、凝膠過濾介質的選擇
    二、洗脫劑的選擇
    三、層析柱的選擇
    四、選擇預裝柱
    第五節層析技術
    一、凝膠的準備
    二、裝柱
    三、樣品和洗脫劑的準備
    四、加樣
    五、洗脫技術
    六、樣品的檢測、收集和處理
    七、凝膠過濾介質的再生、清洗和儲存
    第六節應用實例
    一、脫鹽
    二、緩衝液交換
    三、相對分子品質的測定
    四、測定多聚物的分子量分佈
    五、混合物的分級分離
    六、蛋白質的復性
    參考文獻
    第六章離子交換層析
    第一節概述
    第二節相關理論
    一、基本原理
    二、離子交換理論
    三、離子交換的解析度
    第三節離子交換劑
    一、基本結構
    二、功能基團和酸鹼性質
    三、離子交換劑的部分性質
    四、離子交換劑的類型
    第四節方案設計和層析技術
    一、離子交換劑的選擇
    二、緩衝液的選擇和層析條件的確定
    三、層析柱的尺寸
    四、離子交換劑的準備
    五、樣品的準備
    六、加樣
    七、洗脫技術
    八、樣品的收集和處理
    九、離子交換劑的再生、清洗、消毒和儲存
    十、大量樣品的離子交換
    十一、分批分離
    第五節技術的應用
    一、酶、蛋白質及肽類
    二、糖類化合物
    參考文獻
    第七章親和層析
    第一節概述
    一、基本原理
    二、親和層析的分離過程
    第二節親和層析配體
    一、親和配體的要求和性質
    二、親和配體的類型
    第三節親和吸附劑
    一、配體的選擇
    二、載體的選擇
    三、連接臂的選擇
    四、親和吸附劑的製備方法
    五、裸露活化基團的封閉和親和吸附劑的儲存
    六、配體濃度的估計
    第四節實驗技術
    一、親和層析操作過程
    二、親和層析的操作注意事項
    第五節親和層析的特殊類型
    一、凝集素親和層析
    二、免疫親和層析
    三、金屬鰲合親和層析
    四、染料配體親和層析
    五、共價層析
    第六節應用
    一、抗體和抗原的純化
    二、酶的純化
    三、糖蛋白和脂蛋白的純化
    四、其他蛋白質的純化
    五、細胞的純化
    參考文獻
    第八章層析聚焦
    第一節概述
    第二節原理簡介
    一、蛋白質的等電點
    二、pH梯度的形成
    三、聚焦效應
    第三節多組分緩沖劑與多緩衝離子
    交換劑
    一、多組分緩沖劑
    二、多緩衝離子交換劑
    三、其他緩衝液
    第四節實驗要點
    一、PBE、PB和起始緩衝液的選擇
    二、凝膠柱的裝填
    三、樣品的準備
    四、上樣和洗脫
    五、從分離的蛋白質中除去多組分緩沖劑的方法
    六、多組分緩衝離子交換劑的再生
    七、層析聚焦實驗中需注意的問題
    八、結果討論
    第五節技術的應用
    一、分離模型蛋白質
    二、層析聚焦法分離純化HIV一1反轉錄酶
    三、層析聚焦法分離谷胱甘肽轉硫酶
    四、層析聚焦法分離人血清載脂蛋白
    (apocⅢ)及其亞型
    五、鑒定某些酶的性質
    參考文獻
    第九章反相層析
    第一節引言
    第二節原理
    一、反相層析的概念
    二、溶質分子的疏水性質
    三、反相層析的保留機理
    四、反相分離過程中的參數
    第三節反相層析介質
    一、反相層析介質的基本結構
    二、反相層析介質的參數和性質
    三、幾種常見的反相介質
    第四節反相層析的流動相
    一、有機溶劑
    二、流動相的pH控制
    三、離子對試劑
    第五節方案設計和層析技術
    一、反相介質的選擇和層析柱的準備
    二、流動相的選擇和準備
    三、樣品的準備和加樣操作
    四、洗脫模式的選擇和條件控制
    五、樣品的檢測和收集
    六、層析柱的再生、清洗和儲存
    第六節應用實例
    一、用反相層析對樣品脫鹽
    二、分析型高解析度分離
    三、製備型分離純化
    參考文獻
    第十章疏水作用層析
    第一節引言
    第二節原理
    一、疏水作用層析的概念
    二、疏水作用層析與反相層析的區別
    三、影響疏水作用層析過程的參數
    第三節疏水作用層析介質
    一、疏水作用層析介質的基本結構
    二、常見疏水作用層析介質的種類
    第四節實驗方案設計和層析技術
    一、介質的選擇和層析柱的準備
    二、樣品的準備
    三、層析條件的確定和優化
    四、層析介質的再生、清洗和儲存
    第五節應用實例
    參考文獻
    第十一章電泳技術
    第一節概述
    一、基本原理
    二、凝膠介質
    三、檢測方法
    四、電泳儀器
    第二節天然聚丙烯酰胺凝膠電泳
    一、基本原理
    二、天然PAGE的類型
    三、影響分離效果的因素
    四、蛋白質分子量的測定
    五、天然PAGE的實驗方法
    六、天然PAGE的應用範圍
    第三節SDS-聚丙烯酰胺凝膠電泳
    一、SDS-PAGE的分離原理
    二、SDS-PAGE的類型
    三、影響分離效果的因素
    四、蛋白質亞基分子量的測定
    五、SDS-聚丙烯酰胺凝膠電泳的實驗方法
    六、SDS-PAGE的應用範圍
    第四節等電聚焦
    一、原理
    二、載體兩性電解質和pH梯度的形成
    三、載體兩性電解質等電聚焦方法
    四、固相pH梯度介質及其pH梯度的形成
    五、固相pH梯度等電聚焦方法
    六、等電聚焦系統的選擇
    七、等電聚焦的應用範圍
    第五節雙向電泳
    一、樣品製備
    二、等電聚焦
    三、緩衝液置換
    四、梯度SDS-PAGE
    五、檢測
    六、蛋白質圖譜分析
    七、應用
    第六節免疫電泳
    一、原理
    二、免疫電泳類型
    三、免疫電泳技術
    四、電泳方法
    五、應用
    第七節蛋白質印跡
    一、原理
    二、實驗材料的選擇
    三、蛋白質印跡實驗方法
    四、應用
    第八節毛細管電泳
    一、原理
    二、毛細管電泳的主要類型
    三、毛細管電泳儀
    四、影響毛細管電泳分離的主要因素
    五、毛細管電泳過程
    六、毛細管電泳的應用
    參考文獻
    第十二章離心分離技術
    第一節概述
    第二節離心設備及其用途
    一、離心機
    二、轉子
    三、離心管
    四、離心機附件
    第三節基本原理和計算
    一、離心加速度、離心力和相對離心力
    二、沉降速度
    三、沉降系數
    四、離心時間和K因子
    五、分子品質的計算
    第四節超離心技術
    一、製備超離心
    二、分析超離心簡介
    第五節應用實例
    一、差速離心法從細菌中分離糖原
    二、非連續密度梯度區帶離心法分離
    甲型肝炎病毒(HAV)
    三、連續密度梯度區帶離心法的應用
    參考文獻
    第十三章其他分離技術
    第一節泡沫分離法
    一、泡沫分離法的分類
    二、泡沫分離技術的基本原理
    三、泡沫分離的操作方式及其影響因素
    四、泡沫分離的應用
    第二節液膜分離法
    一、液膜及其分類
    二、液膜分離的機理
    三、液膜材料的選擇與液膜分離的操作過程
    四、液膜分離技術的應用
    第三節膜層析技術的原理與應用
    一、概述
    二、膜層析的原理和特點
    三、膜層析介質材料及其組件
    四、膜層析的製備
    五、膜層析的應用
    六、展望
    參考文獻
    生化分離實驗部分
    實驗1凝膠層析法測定蛋白質相對分子品質
    實驗2酵母蔗糖酶的提取與純化
    實驗3等電聚焦電泳法測定蛋白質的等電點
    實驗4蛋白質的雙向聚丙烯酰胺凝膠電泳
    實驗5親和層析純化胰蛋白酶
    參考文獻

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